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大肠杆菌显色培养基作用是什么?具体操作的步骤
点击次数:307 发布时间:2018-11-23
   大肠杆菌显色培养基作用是什么?具体操作的步骤
  
  大肠杆菌显色培养基原理
  
  M1295I配方根据ISO166492:1999设定的标准
  
  X-葡萄糖醛酸检测-葡萄糖醛酸酶
  
  大肠杆菌——蓝绿色
  
  其他-无色
  
  大肠杆菌显色培养基操作步骤
  
  1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
  
  2、取样品液1ml加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上;
  
  3、36℃培养18~24h,选用有30~200个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
  
  总大肠杆菌=蓝绿色菌落;
  
  4、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36℃培养12-16小时,挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装4种x4套)。
  
  大肠杆菌显色培养基使用方法:
  
  1.称取本品干粉41.6g,用1000mL蒸馏水或纯水溶解,可按比例扩增或缩小。
  
  2.混合均匀加热至100℃,并不断搅拌直至完全溶解,无需灭菌。
  
  3.采用倾注法:将培养基水浴冷却至约50℃,准备直径90mm已灭菌平皿,每个培养皿接种1ml样品,然后倾注约15ml上述溶解的培养基,混匀使其凝固,倒置,37℃培养24小时。
  
  4.采用表面接种法:冷却至约50℃,摇匀将培养基倾注于已灭菌平皿中。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4℃)。样品用划线接种法或滤膜法,37℃培养24小时。
  
  大肠杆菌显色培养基注意事项:
  
  1.称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
  
  2.干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。
  
  3.自制平板时需注意培养基的厚度,厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降,开裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基,平板培养基厚度至少为2mm。
  
  
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